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        中國倉鼠卵巢細胞(CHO/DHFR)

        中國倉鼠卵巢細胞(CHO/DHFR)

        產品時間:2019-04-11

        簡要描述:

        中國倉鼠卵巢細胞(CHO/DHFR)公司一直腳踏實地,深耕市場,洞察廣大消費者的需求,為消費者提供高品質產品而努力,一切從客戶需求出發,為客戶需求打造專業的細胞產品,是我司能一直跑在科研市場前沿的秘訣所在,為回饋客戶,特展開8折優惠溫暖沖擊波活動,盡情享受吧!

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        中國倉鼠卵巢細胞(CHO/DHFR)
        細胞介紹
        該細胞為二氫葉酸還原酶缺陷細胞。在沒有HT (胸腺嘧啶)時細胞會死亡。細胞培液中加氨甲喋呤可以防止對藥物低抗性的回變細胞的生長。
         
        細胞特性
        1)來源:中國倉鼠
        2)形態:貼壁生長時,呈上皮細胞樣。
        3)含量:>lxl06 個/mL
        4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
        5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
         
        中國倉鼠卵巢細胞(CHO/DHFR)細胞用途:僅供科研使用。
        細胞培養步驟
        1)培養基及培養凍存條件準備:
        1.準備IMDM培養基(GIBCO);優質胎牛血清,15%,雙抗1%;用于表達蛋白時,也可使用懸浮培養基,使細胞懸浮生長。
        2. 培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
        3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
        2)細胞處理:
        1.復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將
        細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
        2.細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄,補加l-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
        3.細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
         
        下面T25瓶為例;
        細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數量分配到凍存管中,注意凍管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
         
        中國倉鼠卵巢細胞(CHO/DHFR)注意事項:
        收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們電聯。
        所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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